自1931世界shang第1臺(tái)電子顯微鏡誕生以來，微觀世界的大門開放的更加廣闊。目前電鏡被廣泛運(yùn)用于各器官系統(tǒng)疾病的病理診斷中，除了運(yùn)用在腫瘤的診斷與鑒別診斷中，用得最多的是腎臟活檢和某些皮膚疾病的診斷，其中透射電子顯微鏡是最早，最guang泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一種電鏡。隨著電鏡在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用，人類通過觀察細(xì)胞膜和細(xì)胞漿內(nèi)的各種細(xì)胞器和細(xì)胞核的細(xì)微結(jié)構(gòu)及其病理變化，由此產(chǎn)生了亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)病理學(xué)（substructural pathology），又稱超微結(jié)構(gòu)病理學(xué)（ultrastructural pathology）。

下面遠(yuǎn)慕為大家介紹電鏡生物樣品固定液的選擇及其配方：

1、緩沖液的配制

在配制固定液之前，應(yīng)先配制緩沖液。

0.2M磷酸緩沖液的配制：

磷酸2氫鈉（NaH2PO4.H2O） 2.6g

磷酸氫2鈉（Na2HPO4.12H2O） 29g

重蒸餾水加至500ml

調(diào)pH至7.4

2、（灌注）固定液的配制

4%多聚甲醛：用0.2M磷酸緩沖液配制，重蒸餾水補(bǔ)足容積。

4%多聚甲醛+（0.5-2%）戊二醛，以4%多聚甲醛+1%戊二醛為例，配方如下：

0.2M磷酸緩沖液的配制 100ml

25%戊二醛（電鏡專用） 4ml

重蒸餾水加到200ml

多聚甲醛和戊二醛混合固定液配制方法：

（1）4%多聚甲醛+5%戊二醛：溶解2g多聚甲醛于25ml雙蒸水中，80℃水浴，搖動(dòng)使之溶化后加1-3滴1M NaOH，使溶液澄清。冷卻后加10ml 25%戊二醛，再加15ml 0.2PB，調(diào)pH備用。此固定液中含多聚甲醛4%，戊二醛5%，屬高滲液，但固定效果不錯(cuò)，尤其對(duì)細(xì)胞內(nèi)的微管保存較好。

（2）2%多聚甲醛+2%戊二醛：溶解1g多聚甲醛于25ml雙蒸水中，80℃水浴，搖動(dòng)使之溶化后加1-3滴1M NaOH，使溶液澄清。冷卻后加4ml 25%戊二醛，再加21ml 0.2PB，調(diào)pH備用。常規(guī)固定選用這種配方。

（3）4%多聚甲醛+0.5%戊二醛：溶解2g多聚甲醛于25ml雙蒸水中，80℃水浴，搖動(dòng)使之溶化后加1-3滴1M NaOH，使溶液澄清。冷卻后加1ml 25%戊二醛，再加24ml 0.2PB，調(diào)pH備用。推薦用作免疫電鏡標(biāo)本固定劑，對(duì)于抗原較強(qiáng)的標(biāo)本，可將濃度降低到2%多聚甲醛+0.25%戊二醛。